2.1 模型制备

2.1 模型制备

2.1.1 抽取腹水

将接种H22瘤株后7d的小鼠3只，颈椎脱臼处死，固定于蜡板上，腹部皮肤消毒后，剪开并剥去腹部皮肤，用高温消毒过的注射器抽取乳白色腹水，放入无菌容器内，置冰块中保存。另取少量腹水，置于加有肝素的试管中，作为观察细胞形态及细胞计数用。将注射器中剩余的腹水，滴一滴于载玻片上，推片，瑞氏染色，并进行细胞分类计数，其中癌细胞数为97%以上方可使用[32]。

2.1.2 接种

① 抽取10ml N.S注入三角烧瓶；

② 用5ml注射器抽取腹水3ml，立即拿入超净台中注入10ml N.S三角烧瓶中，再取5ml N.S注入其中（1:5稀释），摇匀，调细胞计数至2×10⁷个/ml[33]；

③ 取3ml上述细胞悬液于另一三角烧瓶中，再取17ml N.S，即为瘤细胞悬液；

④ 随机留取10只不接种，作为正常对照组，其余60只小鼠接实体瘤；

⑤ 取75%酒精棉球消毒小鼠右前腋下皮肤，用1ml注射器从皮下注射0.2ml瘤细胞悬液[32]。