4.3 裴氏软肝消痞丸对细胞因子的影响

4.3 裴氏软肝消痞丸对细胞因子的影响

细胞因子是由活化的免疫细胞和相关细胞（如纤维母细胞、内皮细胞）分泌产生的具有重要的生物学活性的细胞调节小分子蛋白，在免疫应答的启动、传播和调节中发挥着重要的免疫调控作用，甚至是中心作用，他们除了单独的具有多种生物学活性外，还有彼此之间的相互作用。现代研究表明：IFN-γ主要由活化的T细胞和自然杀伤细胞（natural killer cell

裴正学系列方药的研究

36NK）所分泌，并以多种方式参与影响免疫应答。TNF-α由活化的巨噬细胞/单核细胞和NK细胞、成纤维细胞产生，是迄今发现的抗瘤作用最强的细胞因子[19]，具有全身性作用，主要作用为参与炎症反应、调节免疫应答、抗肿瘤作用。IFN-γ与TNF-α作为反映机体的免疫功能的具体指标，参与肿瘤发生发展、消亡的整个过程。

4.3.1 对肿瘤坏死因子（TNF-α）的影响

TNF-α是由活化的巨噬细胞/单核细胞和NK细胞、成纤维细胞产生的细胞因子，具有介导炎症、免疫调节、抗肿瘤等多种生物学功能。TNF-α对肿瘤细胞具有直接的溶解杀伤和诱导凋亡作用[20-21]。TNF-α抗肿瘤作用的一个重要特点在于仅仅对肿瘤细胞具有细胞毒性作用，而不损伤正常细胞，具有高选择性杀伤功能[22]。其作用机理在于与细胞表面的TNF受体结合，产生氧自由基和过氧化物，导致细胞溶解。同时TNF-α还能促进多种具有抗肿瘤活性细胞因子（如GM-CSF、IL-1、IL-2及IL-6等）的合成与分泌[23-24]，提高肿瘤患者的抗肿瘤免疫防御功能，间接地发挥其多种杀瘤免疫效应。

本实验用ELISA法测定荷瘤小鼠血清中TNF-α的浓度，以检测裴氏软肝消痞丸对肿瘤的治疗作用及对机体的免疫调节作用。结果显示：斑蝥组血清TNF-α的浓度升高，与模型对照组比较，有统计学意义（P<0.05）；裴氏软肝消痞丸各剂量组血清中TNF-α的浓度均高于模型对照组，其中中剂量组的浓度为（85.97±19.41）pg·ml⁻¹，明显高于模型对照组（P<0.05），况且中剂量组TNF-α的浓度也高于阳性药物对照组（斑蝥组）（P<0.05）。提示裴氏软肝消痞丸能够提高机体的免疫力，升高TNF-α在血清中的浓度，从而发挥抗肿瘤的最终目的。

4.3.2 对干扰素（IFN-γ）的影响

IFN-γ主要由活化的T细胞和自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）所分泌，并以多种方式参与影响免疫应答，是体内作用最强的炎症介质之一，其生物学作用非常广泛，能通过多种机制激发炎症反应，在肿瘤的治疗中发挥重要作用。IFN-γ抑制肿瘤细胞增殖机制主要有以下几方面：①能抑制肿瘤内血管生成[10]；②对恶性肿瘤细胞有直接细胞毒作用；③干扰素能影响肿瘤细胞有丝分裂周期，诱导肿瘤细胞凋亡[11]；④通过影响基质而发挥抗肿瘤活性[13]。

本实验用ELISA法测定荷瘤小鼠血清中IFN-γ的浓度，以检测裴氏软肝消痞丸对肿瘤的治疗作用及对机体的免疫调节作用。实验结果显示：斑蝥组小鼠血清IFN-γ的浓度升高，与模型对照组比较，有统计学意义（P<0.05）；裴氏软肝消痞丸中、大剂量组血清中IFN-γ的浓度有不同程度的提高，但均高于模型对照组，其中中剂量组的浓度为（90.85±11.91）pg·ml⁻¹，高于模型对照组（P<0.05）。况且中剂量组IFN-γ的浓度也高于阳性药物对照组（斑蝥组）（P<0.05），提示裴氏软肝消痞丸能够提高机体的免疫力，升高IFN-γ在血清中的浓度，从而发挥抗肿瘤的最终目的。

4.4 阳性对照药物的选择

根据阳性药物的选择原则[25]：①可比性：其功用、主治、剂型、给药途径与新药相似；②合法性：阳性药是《药典》或部颁标准或新批准生产的合法药物；③择优选用：应选用当前学术界或社会公认有效的、有代表性的"好药"。

斑蝥——味辛，性温，归肝、肾、胃经。有破血逐瘀消瘤、攻毒散结之功效。其有效成分为斑蝥素，斑蝥素可抑制肿瘤细胞的生长，诱导肿瘤细胞凋亡[26]。实验证明首先抑制癌细胞蛋白质合成，继而影响RNA和DNA的生物合成，最终阻止癌细胞生长和分裂。而复方斑蝥胶囊的主要成分为斑蝥。研究证明，复方斑蝥胶囊阻断癌细胞分裂周期的M期，破坏癌细胞骨架及其超微结构，提高癌细胞呼吸抑制率和溶酶体酶活性[27]。张建武[28]等研究提示复方斑蝥注射液对小鼠H₂₂肿瘤具有良好的体内抑瘤作用，并提出是复方斑蝥注射液中有效成分斑蝥直接作用的结果。

本实验所用复方斑蝥胶囊从功效以及现代药理研究方面与裴氏软肝消痞丸颇具相似之处，故选其为阳性对照药。

4.5 裴氏软肝消痞丸中单味药物现代研究

为了探讨中医药治疗原发性肝癌的机理，国内外学者做了大量的实验研究工作。裴正学教授治疗肝癌的验方——裴氏软肝消痞丸，经实验研究其可能的抗癌机制与直接杀伤和抑制肝癌细胞，保护和调节机体免疫功能等因素有关。其中：

• 半枝莲：辛、苦，寒。归肺、肝、肾经。功能与主治清热解毒、化瘀利尿。张妮娜等[29]研究发现：半枝莲能有效抑制肿瘤血管生成，其机制可能与阻断内皮细胞迁移、下调VEGF蛋白表达有关。

• 黄芪：具有补气、益卫、托疮的作用。现代药理研究表明：黄芪具有提高小鼠应激能力、增强免疫功能、加速遭受放射线损伤机体的修复的作用。其含有的黄芪皂苷、多糖、微量元素等多种有益成分，可以提高荷瘤小鼠的淋巴细胞增殖反应、提高NK细胞的活性，达到调节机体免疫机能，进而达到抗肿瘤的目的[30]。《珍珠囊》记载黄芪补诸虚不足、益元气的作用。

• 白花蛇舌草：有清热解毒的功效，现代研究证明其有抑杀肝癌细胞的作用，且能明显增强机体的免疫力。

• 海藻：咸寒，归肝肾经，具有消痰软坚的作用。《本草纲目》："海藻，咸能润下，寒能泄热引水，故能消瘿瘤、结核、阴溃之坚聚"。其含有的海藻多糖能通过增强机体免疫力进而间接抑制或杀死肿瘤细胞的目的[32]。

• 昆布：咸寒，归肝肾经，具有消痰软坚的作用。现代研究证明昆布含有的多糖类和核酸类、海带多糖能激活巨噬细胞，进而抑制肿瘤细胞增殖而杀死肿瘤[33]。

• 柴胡：归肝胆经，其提取物对肿瘤有明显抑制作用[34-35]。现代研究表明：柴胡有较好的抗肝损、利胆、降转氨酶的作用。

• 白芍：性苦、酸、甘、微寒，归肝、脾经。有养血调经、平肝止痛、敛阴止汗之功。

综上所述，裴氏软肝消痞丸是治疗原发性肝癌的验方，方中部分中药确有抗癌的功效，但裴氏软肝消痞丸是一个治疗肝癌有机整体，其治疗肝癌并不是因为其中几味抗癌中药的作用，而是注重整体调节，发挥机体自我免疫功能，正如裴老所言："原发性肝癌是本虚标实，认为肿瘤病虽表现在局部，但其实是全身性疾病的局部表现，亦为全身虚而局部标实之病。故在治疗上教授提出：扶正以消积，消积而固本。"亦抗癌药只是治标，而扶正固本方为本验方的核心。

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结语