2.7 免疫组化SP法

2.7 免疫组化SP法

对余下片子进行免疫组化染色：O1同HE染色的步骤A将切片脱蜡；O2 PBS洗23每次5min；O3滴加3%H₂O₂ 10min，目的消除内源性过氧化物酶活性使具有特异性；O4 PBS洗23每次5min；O5切片放入盛有0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0)水浴锅中加热到92℃95℃左右15min，要自然冷却，为使其充分暴露抗原决定簇；O6同2；O7室温条件滴加山羊血清工作液10min；O8滴加一抗在37℃培养箱中孵育2h；O9拿出后冲洗同2；O10滴加生物素二抗工作液，置于37℃培养箱孵育15min；O11拿出后冲洗同2；O12滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液，置于37℃培养箱孵育15min；O13拿出后冲洗同2；O14 DAB显色试剂盒中试剂滴加至切片，显微镜下观察显色，控制反应时间530min后洗涤；O15复染后再脱水，封片；O16显微镜下观片。