2.2 模型建立的方法及评价

2.2 模型建立的方法及评价

2.2.1 方法

2.2.1.1 物理方法

段氏选用健康小鼠，雌雄各半，采用⁶⁰Co-γ射线7.0Gy作1次全身照射，距离2m，辐射剂量率2.275Gy/min，制成AA动物模型。

2.2.1.2 化学方法

周氏将马利兰用蒸馏水配成0.05%混悬液，连续给小鼠按4mg/(kg·d)灌胃给药45天，制成AA动物模型。

2.2.1.3 混合方法（物理化学方法）

孙氏选用健康昆明种小鼠，雄性6~7周龄，体重20±0.3g，采用⁶⁰Co-γ射线3.0Gy照射后于第4天开始给予环磷酰胺（CTX）50.0mg/kg及氯霉素（CH）62.5mg/kg，共3天，制成AA动物模型。

2.2.1.4 免疫介导

姚氏选用Balb/c小鼠，812周龄，体重1620g，雌雄不限，作为受体；DBA/2小鼠，8~10周龄，雌雄不限，作为供体。用DBA/2小鼠制成淋巴细胞混悬液，Balb/c小鼠经γ射线6.0Gy全身照射，4h内立即尾静脉输入上述细胞悬液，制成AA动物模型。

2.2.2 评价

以上各种模型选用的动物都是小鼠，各有其优缺点。物理方法模型是用小鼠受亚致死量或致死量的X或γ射线照射后，发现小鼠造血功能严重障碍，外周血全血细胞减少，其表现与人的急性AA相似。但γ射线照射影响DNA复制，抑制细胞的有丝分裂，使造血干细胞减少，并影响免疫功能，还会损伤全身各器官，毒副作用大。如一过性损害太厉害，小鼠死亡率很高，而一过性损害太轻，小鼠造血功能又会自行恢复。化学方法的缺点是造模时间周期长，容易造成骨髓永久性损伤。混合方法中CTX是烷化剂，具有细胞毒作用，抑制DNA合成，对造血系统敏感，可以较缓慢但持久地抑制骨髓。CH抑制骨髓造血，引起AA，临床上也有报道。γ射线照射影响DNA复制，抑制细胞的有丝分裂，使造血干细胞减少，并影响免疫功能。该模型操作简单，复制周期短，成功率高，死亡率低。缺点是第25天左右模型动物造血功能会恢复正常。如作为AA模型用于研究，应该在20d左右处死动物，检测各项指标。目前用得较多的模型是免疫介导AA模型，由于稳定性好，该模型被许多学者复制，作为AA的研究动物模型。但实验操作复杂，条件要求高，模型动物死亡快，死亡率达100%。可能因为亚致死剂量照射，剂量太大，损伤全身各种器官，毒副作用太大所致。我们通过预实验观察认为小鼠经⁶⁰Co γ射线全身照射，照射高度100cm，时间1min，剂量3.0Gy照射，模型成功率高，动物死亡时间延长。

实验研究