2 实验方法

2 实验方法

2.1 模型制备

严格按照无菌操作，接种实体瘤。从H22瘤株传代小鼠的腹腔抽取乳白色的瘤液参照文献[14]，用生理盐水稀释至瘤细胞计数为2×10⁶个/ml，在小鼠右前腋部皮下接种瘤液0.2ml[14]。

2.2 动物分组及给药剂量

将72只SPF级昆明小鼠按体重及性别用随机法分为12只作为空白组，其余60只接种24h后，随机分为模型对照组；复方斑蝥胶囊（BM）组；裴氏软肝消痞丸（PRGXP）小剂量组；

裴正学系列方药的研究

PRGXP中剂量组；PRGXP大剂量组。给药剂量具体如下：

BM组：临床成人口服量一次3粒，一日2次，每粒0.25g，按60kg体重计算，则成人给药0.025g/kg·d，小鼠用药量相当于成人用药量的10倍，即0.25g/kg·d。

PRGXP组：临床成人口服量一次1包，一日2次，每包6g，按60kg体重计算，则成人给药0.2g/kg·d，PRGXP小剂量组1g/kg（相当于成人临床用量的5倍）；PRGXP中剂量组2g/kg（相当于成人临床用量的10倍）；PRGXP大剂量组4g/kg（相当于成人临床用量的20倍）。

小鼠灌胃容积：0.2ml/10g体重。

裴氏软肝消痞丸与复方斑蝥胶囊临用前分别用蒸馏水溶解制成为混悬液。实验组小鼠灌胃给予等容积的药物，空白组、模型对照组小鼠给予等量蒸馏水，1次/d，连续灌胃10d。

2.3 小鼠一般状态观察

观察各组小鼠在实验期内的毛色、饮食、活动度及排泄等情况。

2.4 抑瘤率的测定

末次给药后24h小鼠称重，脊髓脱臼处死，剖取肿瘤组织，称重，按公式计算抑瘤率：

抑瘤率(%)=[(模型组平均瘤重-治疗组平均瘤重)/模型组平均瘤重]×100%

2.5 胸腺、脾脏指数测定

末次给药后24h小鼠称重，脊髓脱臼处死，取胸腺、脾脏称重。按公式计算胸腺、脾脏指数。计算方法：

胸腺指数(mg/10g)=胸腺重/(结束体重-瘤重)×10

脾脏指数(mg/10g)=脾脏重/(结束体重-瘤重)×10

2.6 ELISA法测定荷瘤小鼠血清TNF-α的浓度