关键词：方药研究 / 实验研究 / 配方资产 / 转化沟通 / 2.7.3 操作步骤
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2.7.3 操作步骤
① 从已平衡至室温的密封袋中取出所需板条。 ② 将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排8孔中，一孔只加样品稀释液作为对照，处理后的标本100μl每孔加入。 ③ 用封板胶封住反应孔，37℃孵箱孵育90min。 ④ 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加洗涤液350μl，静置30s后甩尽液体，在厚迭吸水纸上拍干，洗板2次。 ⑤ 将准备好的生物抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。用封板胶封住反应孔，37℃反应60min。 ⑥ 0.01M TBS洗涤3次，每次浸泡1min左右。 ⑦ 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。用封板胶封住反应孔，37℃反应30min。 ⑧ 0.01M TBS洗涤5次，每次浸泡1~2min左右。 ⑨ 按每孔0.09ml依次加入已在37℃平衡30min的TMB显色液，37℃避光反应，反应过程中，要经常的观察，当肉眼可见标准品的前3～4孔有明显梯度蓝色，后3～4孔差别不明显时，即可加入TMB终止液0.1ml/孔（显色反应最长不要超过30min）。用酶标仪在450nm测定OD值，根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。
2.8 统计学方法
所有实验数据以均数±标准差（x̄±s）表示，多组均数采用单因素方差分析，以p<0.05为有统计学意义。
3 实验结果
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