4.1 裴氏软肝消痞丸方药药理概括

4.1 裴氏软肝消痞丸方药药理概括

现代之肝癌属中医学之"肝积、癥瘕、积聚"等范畴。《素问·遗篇刺法论》曰："正气存内，邪不可干"；《素问·评热病论》云："邪之所凑，其气必虚"；张元素之《活法机要》载："壮人无积，虚人则有之，脾胃虚弱，气血两衰，四时有感，皆能成积"。张仲景《金匮要略·脏腑经络先后病脉证第一》"见肝之病，知肝传脾，当先实脾"。故脾虚是肝癌发生发展的根本原因，脾虚则运化失健，水谷不化，湿热内聚，久之则气滞血瘀，湿热瘀毒结于肝脉，因虚而致实，而终成虚实夹杂之患。

裴氏软肝消痞丸由黄芪、丹参、莪术、海藻、皂角刺、白花蛇舌草、半枝莲等药物组成。根据肝癌之"虚、瘀、毒"的病机特点，全方共凑益气健脾、活血化瘀、软坚散结、清热解毒之功。

4.1.1 黄芪

黄芪(Radix Astragali)为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，味甘性微温，归肺脾

裴正学系列方药的研究

经。具有补气升阳、益卫固表、利水消肿、托疮生肌之功，为补气健脾的代表药物之一。黄芪含有多种多糖、皂苷、黄酮、氨基酸、微量元素等物质，具有抗肿瘤、调节免疫[70]、抗辐射等作用，其中黄芪总苷对肝癌细胞凋亡率可达11.97%~54.76%，其机制可能是通过上调抑癌基因wt-p53的表达，将细胞周期阻滞于G期[71]；黄芪有效成分F3可增强淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)活性和T淋巴细胞的功能，提高对肿瘤细胞的杀伤效应和体液免疫功能[72,73]。

4.1.2 丹参

丹参酮是从丹参中提取的脂溶性有效成分（单体），其结构中含有醌型结构，易被氧化还原，可参与机体的多种生化反应而具有多种生物学活性。其主要有效成分丹参酮ⅡA，对肿瘤细胞具有天然的杀伤、诱导分化和凋亡等作用。其对SMMC-7721的凋亡率在6.59%~24.17%之间，可能与细胞内TGF-β1、COX-2 mRNA及VEGF的表达水平下调、p38MAPK的表达上调有关[74-76]；另一方面，丹参酮ⅡA对HepG2细胞凋亡率却可达60%，可能与上调P53、Bax的表达水平，而拮抗促肿瘤因子Bcl-2，并下调其表达有关[77,78]；丹参酮的另一有效成分丹参酮Ⅰ对HepG2亦有较明显的抑制作用[79]。

4.1.3 莪术

莪术(Rhizoma Curcumae)是姜科植物蓬莪术、温郁金、桂莪术的根茎，性温、味辛、苦，有活血破瘀、行气消积止痛等多种功效。莪术挥发油中含有多种抗癌有效成分，如蓬莪术环二烯、吉玛酮、莪术二酮、新郁金二酮、莪术醇(curcumol)、异莪术醇、榄香烯等。现代研究莪术油对肝癌细胞生长的抑制作用表明：其可通过抑制HepG2细胞COX-2和VEGF基因表达而明显抑制体外培养的HepG2细胞生长，并诱导其凋亡[80,81]；而其体内抗肿瘤作用，可能与下调Bcl-2及上调P16、P21表达有关[82,83]。

4.1.4 海藻

海藻(Sargassum)味咸，性寒，归肝、肾经，有消痰软坚，利水消肿的作用。《本草新编》中记载：海藻，专能消坚硬之病，盖咸能软坚也。据Siddhant研究表明，海藻可促进小鼠T细胞增殖反应，具有免疫调节、抗突变、诱导细胞分化、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等多种功效，其中其免疫调节作用可能与海藻多糖激活巨噬细胞、T和B淋巴细胞、网状内皮系统、补体和促进干扰素、白细胞介素生成有关[84]。而抗肿瘤作用与海藻中的萜类化合物提高机体IL-6、TNF-α的含量，从而增强机体的免疫功能有关[85]。杨文豪[86]等首次提取出具有较强抑癌活性的环肽类化合物A1、A2，并证明其抗癌活性明显强于阿霉素。

4.1.5 皂角刺

皂角刺为豆科植物皂荚(Gleditsia sinensis Lam)的干燥棘刺。《本草纲目》中记载，其"辛、温、无毒，能治痈肿，妒乳，风病恶疮，胞衣不下，杀虫"。其主要的化学成分有黄酮苷、酚类、氨基酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚甾醇、谷甾醇以及二十九碳烷等，而这些成分不同程度的显示出抗肿瘤作用，其中黄酮类化合物较突出[87]。现代研究认为其较确切的抗肿瘤作用可能与抑制增殖细胞核抗原(PCNA)、突变型P53蛋白和提高细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的表达有关[88-90]。

4.1.6 白花蛇舌草

白花蛇舌草(Herba Hedyotis Diffusae)为茜草科植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd)的干燥全草，味甘淡，性凉，内含多种化学成分，主要为蒽醌、萜类、多糖、微量元素和甾醇及其苷类化合物，具有清热利湿、解毒消痈之功效。临床上广泛应用于各种癌症的治疗，现代药理研究表明白花蛇舌草具有抗肿瘤、抗菌、消炎、增加免疫功能等作用[91]。白花蛇舌草提取物对SMMC-7721的增殖抑制率达到39.40%，有效靶基因达20条，考虑是其多途径抗肿瘤作用[92]。白花蛇舌草多糖亦可抑制人肝癌细胞Bel-7402的生长，诱导细胞凋亡，其机制可能与上调抑癌基因P53、抑制原癌基因Bcl-xL表达、直接影响肿瘤细胞能量代谢有关[93]。亦有研究表明，在小鼠体内，白花蛇舌草对肝癌H22的抑瘤率可达48.6%，可能是通过诱导H22肝癌细胞热休克蛋白70(HSP70)表达，增强其免疫原性而发挥抗肿瘤作用[94,95]。

4.1.7 半枝莲

半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)又名狭叶韩信草，是唇形科植物半枝莲的干燥全草，味辛、苦，性寒，具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效。研究表明，半枝莲提取物，高剂量[12g/(kg·d)]具有诱导H22细胞凋亡的作用，其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关[96,97]；而对于诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡，韦鹏涯等[98]研究表明其能够上调caspase-3蛋白以及下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达；另外，半枝莲提取物还可抑制HepG2及QGY-7701等增殖，其机制可能与通过激活Bcl-2基因家族抑癌基因、诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期有关[99]。

4.2 模型的制备

本实验采用的小鼠H22肝癌移植模型，属于经典的药物抗肿瘤作用的体内实验模型。造模的方法是将肿瘤细胞接种于小鼠右前腋下，形成实体瘤并不断增殖。该模型的优点在于能够保持机体的完整性，还原疾病发生发展的自然环境，因此能够更加客观的反映药物在体内的分布及代谢过程，发挥抗肿瘤活性。

4.3 裴氏软肝消痞丸的抑瘤作用

本实验结果显示：裴氏软肝消痞丸小、中、大剂量组的平均瘤重均低于模型对照组，分别为(0.935±0.227)g、(0.776±0.122)g、(0.926±0.237)g，与模型对照组比较均有统计学意义(p<0.05)，抑瘤率分别为23.9%、36.8%和24.5%。说明裴氏软肝消痞丸具有良好的肿瘤抑制作用。

4.4 裴氏软肝消痞丸对免疫器官的影响

"正气存内邪不可干，邪之所凑其气必虚"，正气即是人体的免疫功能[100]。现代肿瘤学认为，肿瘤的发生、发展及预后与带瘤机体的免疫状态密切相关。Burnet提出的"免疫监视"学说认为，正常情况下，机体免疫系统能够识别并及时清除突变细胞，从而防止肿瘤的发生。当机体免疫功能低下或机体的抗原提呈细胞功能低下或缺陷或机体内存在一定量的"增强抗

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"体"等，均有助于肿瘤细胞逃避宿主免疫系统的攻击，而导致肿瘤的发生。

胸腺是机体最重要的中枢免疫器官，为T细胞发育、分化、成熟的场所。而T细胞为人体重要的免疫细胞，可介导细胞免疫及参与一系列免疫功能的发挥与调节，尤其在肿瘤免疫起着重要作用。脾脏是人体最大的免疫器官，是免疫细胞（T、B细胞）定居、免疫应答的场所，并合成抗体、干扰素和细胞因子等多种免疫活性物质。因而胸腺、脾脏指数能反映免疫器官的发育、免疫细胞的分化状况及免疫功能的强弱。现代研究表明[101,102]，健脾益气中药可增强肝癌患者的免疫功能，尤其改善T细胞功能从而加强免疫监视以达到抑瘤抗转移的目的。从实验中观察到：模型组小鼠胸腺、脾脏体积缩小，重量减轻，个别胸腺分叶不清，呈灰白色，脾脏颜色变淡红色。裴氏软肝消痞丸各剂量组及空白组小鼠胸腺指数均高于模型组，与模型组比较有差异性（p<0.05）。裴氏软肝消痞丸各剂量组及空白组小鼠脾脏指数均高于模型组，与模型组比较有差异性（p<0.05）。实验结果表明：裴氏软肝消痞丸对胸腺指数和脾脏指数具有明显的提升作用，能够提高机体的非特异性免疫功能，增强机体对外界有害刺激的抵抗力，减少机体的损伤。