1 消风Ⅱ号胶囊抗大鼠佐剂性关节炎实验研究

1 消风Ⅱ号胶囊抗大鼠佐剂性关节炎实验研究

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种病因不明的慢性、炎性、系统性的自身免疫性疾病，目前常用非甾体抗炎药及免疫抑制剂改善临床症状，但治疗过程中存在消化道不良反应、肾脏毒性、血小板功能降低、生殖能力损害等毒副作用，从而影响治疗效果。佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）大鼠的临床、病理表现及免疫学指标与RA有许多相似之处，是研究RA及筛选评价抗炎免疫药物的较理想动物模型之一。消风Ⅱ号胶囊是我国著名老中医裴正学教授40余年治疗类风湿关节炎的临床经验总结，具有温阳散寒、活血化瘀、祛风止痛之功能。本实验观察了消风Ⅱ号胶囊对AA大鼠继发病变的预防和治疗作用。

1.1 材料与方法

1.1.1 药品

消风Ⅱ号胶囊，内装棕色粉末，100粒/瓶，每粒为0.375g，临床应用量为2.25g/60kg，大鼠给药剂量为成人临床用量的5倍、10倍。由兰州中药厂提供。

1.1.2 动物

Wistar雄性大鼠，体重180～200g，由兰州大学实验动物中心提供，合格证号：医动字第14-006号；实验室环境设施合格证号：医动字第14-018号。实验室环境：温度20℃～22℃，相对湿度：45%～55%。

1.1.3 试剂及其配制

1.1.3.1 试剂：

• 卡介苗（50mg/支），上海生物制品研究所
• 地塞米松磷酸钠注射液，天津药业焦作有限公司
• 雷公藤多甙片（10mg/片），黄石飞云制药有限公司
• 羊毛脂，Sigma（由兰州轻工化工研究所馈赠）
• 液体石蜡，天津市化学试剂第二厂

1.1.3.2 Freund's完全佐剂的制备：

取液体石蜡10g和羊毛脂5g加热至70℃熔融振摇，高压灭菌。临用前在超净工作台内，针管吸取熔融液10ml加入经56℃灭活的卡介苗100mg，将两只20ml无菌注射器接通来回推拉，充分混匀乳化，直至将其滴在水面上呈半球形不散开为止，即为Freund's完全佐剂，备用。

1.1.4 仪器

JA-2003千分之一电子天平、S-648D电热恒温水浴箱、SW-CJ-1F生物净化工作台、0-125mm游标卡尺。

1.1.5 实验方法

1.1.5.1 大鼠Freund's完全佐剂性关节炎（AA）模型的建立

试验前用游标卡尺测量每只大鼠的左、右后肢踝关节基础周长值，消毒后于每鼠左后肢足趾皮内注射Freund's完全佐剂0.1ml。

1.1.5.2 消风Ⅱ号胶囊对AA大鼠继发病变的预防实验

取AA大鼠40只随机分成5组，即模型对照组、消风Ⅱ号胶囊低剂量组（188mg/kg）、高剂量组（375mg/kg）、西药阳性地塞米松组（0.5mg/kg）、中成药阳性雷公藤多甙片组（7.5mg/kg），另设正常对照组，每组8只。致炎7d后每日灌胃给药1次，连续灌胃给药7d，灌胃容积为1.0ml/100g体重，模型对照组给予等容积的蒸馏水。地塞米松组腹腔注射0.5ml/100g体重。每3d测量一次大鼠的左、右后肢踝关节周长，计算踝关节肿胀度及肿胀抑制率。同时观察体重变化、前肢、耳和尾部病变发生率和严重度，并按5级评分法评分，计算病变发生抑制率。

计算公式：

• 踝关节肿胀度（cm）= 致炎后踝关节周长 - 致炎前踝关节周长
• 踝关节肿胀抑制率（%）=（对照组平均踝关节肿胀度 - 给药组平均踝关节肿胀度）/ 对照组平均踝关节肿胀度 × 100%
• 病变发生抑制率（%）=（对照组病变发生平均分值 - 给药组病变发生平均分值）/ 对照组病变发生平均分值 × 100%

1.1.5.3 消风Ⅱ号胶囊对AA大鼠继发病变的治疗试验

分组、给药剂量和途径同1.1.5.2，致炎后7d开始用药，连续21d，并每3d测量一次试验组大鼠的左、右后肢踝关节周长，计算踝关节肿胀度及肿胀抑制率。同时观察体重变化、前肢

裴正学系列方药的研究

耳和尾部病变发生率和严重度。并按5级评分法评分，计算病变发生抑制率。试验结束时，称大鼠体重，颈部脱臼处死大鼠，解剖，取出各组大鼠的胸腺、脾脏称重，并以每100g体重求出胸腺、脾脏指数。

胸腺(脾)重量指数(mg/100g)=胸腺(脾)重量/大鼠体重×100。