3.1 裴氏升血颗粒对荷瘤小鼠5-Fu化疗减毒的影响

3.1 裴氏升血颗粒对荷瘤小鼠5-Fu化疗减毒的影响

3.1.1 全身情况

一般观察可见，模型组小鼠第5天起出现皮毛散乱，右前腋部皮下隐约可见瘤体，小鼠出现精神状态差、饮食减少、活动迟缓、扎堆、倦卧、嗜睡、毛无光泽而枯乱、毛色暗等现象，造模后第8~10d之间，瘤体增长迅速，表面凹凸不平，可见多个结节，边界不清，实验结束时解剖模型组小鼠发现瘤体较给药组生长旺盛。5-Fu组小鼠瘤体增长较模型组慢，精神、饮食较模型组差。而裴氏升血颗粒各剂量合用5-Fu组小鼠与模型组及5-Fu组比较，毛色较光亮，精

裴正学系列方药的研究

神、饮食均较好，瘤体增长慢。

3.1.2 裴氏升血颗粒对荷瘤小鼠5-Fu化疗免疫器官胸腺、脾脏的影响

模型组小鼠胸腺、脾脏体积缩小，重量减轻。5-Fu组小鼠胸腺、脾脏体积缩小、重量减轻的更明显。5-Fu组胸腺指数低于模型组，为15.2±3.9(mg/10g)，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)，PG各剂量合用5-Fu组可提高小鼠胸腺指数，其中高、中剂量合用5-Fu组小鼠胸腺指数分别为23.3±2.6(mg/10g)、21.1±2.8(mg/10g)，与5-Fu组比较均有显著性差异(p<0.05)，而低剂量合用5-Fu组与5-Fu组比较无显著性差异(p>0.05)。5-Fu组脾脏指数低于模型组，为33.7±6.4(mg/10g)，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)，PG各剂量合用5-Fu组小鼠脾脏指数均高于5-Fu组，其中高、中剂量合用5-Fu组小鼠脾脏指数为48.8±9.8(mg/10g)、43.2±5.4(mg/10g)，与5-Fu组比较有显著性差异(p<0.05)，而低剂量合用5-Fu组与5-Fu组比较无显著性差异(p>0.05)。(见表1、图1、图2)

表1 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠免疫器官的影响(n=12，x̄±s)

注：△p<0.05

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图1 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠胸腺指数的影响(n=12，x̄±s)

(△p<0.05，与模型组比较；*p<0.05，与5-Fu组比较)

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图2 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠脾脏指数的影响(n=12，x̄±s)

(△p<0.05，与模型组比较；*p<0.05，与5-Fu组比较)

3.2 裴氏升血颗粒对荷瘤小鼠5-Fu化疗增效的影响

裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠抑瘤率的影响表现为：5-Fu组及不同剂量裴氏升血颗粒合用5-Fu组对荷瘤小鼠瘤重均有明显抑制作用，其平均瘤重与模型组比较均有显著性差异(p<0.05)。其中裴氏升血颗粒高、中剂量合用5-Fu组平均瘤重分别为1.044±0.354(g)、1.138±0.214(g)，与5-Fu组比较有显著性差异(p<0.05)，抑制率分别为62.66%和59.30%。(见表2、图3)

表2 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠抑瘤率的影响(n=12，%，x̄±s)

注：△p<0.05，与模型组比较；*p<0.05，与5-Fu组比较。

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图3 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠抑瘤率的影响(n=12，%，x̄±s)

3.3 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠肿瘤组织中P27蛋白表达的影响

各治疗组肿瘤组织中P27阳性细胞数的表达明显高于模型组，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)。5-Fu组肿瘤组织中P27蛋白的阳性细胞数为10.52±1.24，PG各剂量+5-Fu组肿瘤组织中P27蛋白阳性细胞数的表达不同程度高于5-Fu组，以PG高、中剂量+5-Fu组最为明显，其P27蛋白的阳性细胞数分别为18.65±1.19和15.12±1.33，与5-Fu组之间有显著性差异(p<0.05)。(见表3、附录1)

表3 裴氏升血颗粒合用5-Fu对H22小鼠肿瘤组织中P27表达的影响(n=6，x̄±s)

注：△p<0.05，与模型组比较；*p<0.05，与5-Fu组比较。

3.4 裴氏升血颗粒合用5-Fu对小鼠H22肿瘤细胞周期及凋亡率的影响

各剂量裴氏升血颗粒合用5-Fu组与5-Fu组对肿瘤细胞周期分布比例有不同程度的影响，5-Fu组的G0/G1期为42.25±15.16(%)，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)，而各剂量裴氏升血颗粒合用5-Fu组较5-Fu组G0/G1期都有不同程度升高，其中以PG高、中剂量+5-Fu组作用最明显，G0/G1期分别上升达到57.83±10.70(%)、54.07±8.98(%)，与5-Fu组比较有显著性差异(p<0.05)。5-Fu组及各剂量裴氏升血颗粒合用5-Fu组S期均较模型组

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降低，其中以高剂量合用5-Fu组下降最为显著，降为30.53±6.24(%)，与5-Fu组比较有显著性差异(p<0.05)。在模型组，没有观察到凋亡细胞亚二倍峰；各剂量PG+5-Fu及5-Fu治疗后，出现凋亡细胞的亚二倍峰，高剂量组效果最好。5-Fu可诱导肿瘤细胞凋亡，其凋亡率25.03±3.23(%)，与模型组比较有显著性差异(p<0.05)；各剂量裴氏升血颗粒合用5-Fu组均可提高肿瘤细胞的凋亡率，以PG高、中剂量+5-Fu组效果最为明显，凋亡率达到53.48±3.89(%)、48.52±5.79(%)，与5-Fu组比较有显著性差异(p<0.05)。表明PG可协同5-Fu诱导肿瘤细胞发生凋亡，增加5-Fu的抗肿瘤效果。(见表4，附录2)

表4 裴氏升血颗粒合用5-Fu对荷瘤小鼠肿瘤细胞周期及凋亡率的影响(n=6，x̄±s)

注：△p<0.05，与模型组比较；*p<0.05，与5-Fu组比较。

讨论

导师裴正学教授，结合自己四十多年的临床经验，认为"正虚"是恶性肿瘤发生、发展的根本原因；扶正固本是治疗恶性肿瘤的基本法则，在应用这一法则时以"健脾补肾"为其精髓；由此拟定"兰州方"经40余年的不断实践、充实、重组，最后制成"裴氏升血颗粒"，其组成主要有：六味地黄汤、生脉散、北沙参、党参、太子参、桂枝、大枣、五味子、炙甘草、白芍等。"四参"集健脾益气之大成，为补益后天之本之劲旅，合生脉散益气补肺使四参健脾益气之功益彰；六味地黄汤为补益肾气之专方，重用山萸肉（30g）使补益先天之功益彰；桂枝汤：桂枝、白芍、生姜、甘草、大枣为完整之桂枝汤组成，此方"外合营卫，内安脏腑"前人称之为群方之冠。裴老认为："兰州方"中之桂枝汤在大补先天与后天之同时加强了调和营卫内安脏腑之功，实则加强了植物神经系统、代谢系统、内分泌系统、免疫系统之调节作用。浮小麦、甘草、大枣为甘麦大枣汤，古人用此方治疗妇女精神抑郁症疗效确切。裴老认为：兰州方中之甘麦大枣除了具有调节植物神经系统作用外，尚有安神镇静、调节思维之作用，补充了上述主要未尽之功。综上所述"兰州方"以扶正固本之大法加强了人体正气，从而达到扶正祛邪的作用，具有良好抗肿瘤及减毒增效的临床疗效。

祖国医学认为人类发病学方面，以"正气内虚"为致病之本。《素问》提出"正气存内，邪不可干，邪之所凑，其气必虚"。《外科正宗》说："积之成者，正气之虚也，正气虚而后积成"，直接把《素问》"正虚发病"的观点应用于肿瘤之发病，只有正气不足的情况下，邪气才能侵犯人体，致气血阴阳失调，而形成肿瘤。《灵枢·刺节真邪篇》说："真气者，所受于天，与谷气并而充其身也"，真气包含着先天与后天两个方面，历代医家把先天方面归于两肾，名曰"元气"（原气）；把后天方面归于脾胃，名曰"中气"（谷气）。脾主中气，肾主元气，因此在"扶正固本"法则中，"健脾"与"补肾"便是最重要的两端。实验研究证明，中医的"脾"、"肾"具有免疫系统、内分泌系统、代谢系统、植物神经系统、胃肠胰内分泌系统等诸方面的意义，"健脾补肾"具有改善上述各方面功能的作用。现代研究表明，扶正培本药用以治疗肿瘤有以下作用：①能促进机体免疫功能，提高淋巴细胞增殖和网状内皮系统活力；②能保护和改善骨髓造血功能，提高血液细胞成分；③能提高内分泌体液的调节功能，促进下丘脑—垂体—肾上腺轴皮质功能；④能调整患癌机体内环磷腺苷和环鸟苷酸的比值，有利于抑制癌细胞的生长；⑤有双相调节作用；⑥能提高机体物质代谢；⑦能减轻放化疗毒副作用，增强放化疗的效果；⑧某些扶正方药有直接抑癌、控制癌细胞浸润和转移的作用。

本实验通过测定各组肿瘤组织中P27蛋白的表达情况及肿瘤细胞凋亡的情况来进一步探讨裴氏升血颗粒抗肿瘤的作用机制。通过对荷瘤小鼠抑瘤率及免疫器官指数的观察，探讨其对化疗药物的增效减毒作用。